ГОСКОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМ. БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МИНСЕЛЬХОЗЕ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОДЕ ЧЕС ТЗ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ * КОРМАХ И ВНЕ&-НЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХЕ-я

Москва - 1983

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МБТОДИЧВСКИВ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕС1В ПЕС1ИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХШ

Данные методики апробированы и рекомендованы в качвотва официальных группой экспертов при Гоокомиосии ло химическим оредотвам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками

при МСХ СССР

Москва-1983

промывают петрохейнш эфиром порциями по 15-20 од.

Обьедияедаый эфирный экстракт сушат путем фильтрования через воронку о безводнш сернокисддо натрием (предварительно смоченным дотролейным эфиром). Затем экотракт упаривают ггри тоыде-ратуро 50~55°С на ротационном испарителе досуха. Остаток раство ряет в 10 мд ацетона и долят на две равные части по 5 од. Одна часть используется для анализа хлороргаиических пестицидов, другая - симм-триазкяовых горбвцидов. Экстракт для определения хлорорганических пестицидов подвергается сернокислотной очистке.

Для этого ацетоновый экстракт упаривают да ротационном испарителе при температуре 50-55°С досуха, остаток смывается 5 од гб'ссанэ и перекосится в пробирку с притертой пробкой вместимостью 15 мл. Затем в пробирку приливают 1 од кокцонтрировэкной серной кислоты к смесь осторожным покачиванием перемешивают в течение 2-х минут. После разделения фаз пипеткой отбирают 2 од гексанового сдоя и переносят ы другую пробирку вместимостью 15 од, туда же добавляют 3 мд 0,5 и раствора бикарбоната натрия. Покачиванием перемешивают, дают разделиться фазам.

Из верхнего слоя отбирают микрошярицом 3-5 мкл экстракта и анализируют методом газожидкостной хроматографии с использованием электровнозахватаого детектора.

Вторая порция экстракта (5 мл) для определения снмм-триази-новнх гербицидов в большинстве случаев может быть использована для анализа без предварительной очистки.

В тех случаях, когда экстракты сильно загрязнены, может быть применена следующая очистка. Ацетоновый экстракт упаривает -ся но ротационном иопг.рителе досуха, а сухой остаток смшавтся горячим (70-О0°С) 0,6 н раствором соляной кислоты (трижды порциями по 10 мл) и фильтруется через складчатый фильтр в дели-

-ao-

тельяую воронку. Реакция среди доводится до PFT-9 добавлением 8тЗ»б 20^ водного раствора Н^ОН и симм-триавикн екстрогн-рутотся трехкратно хлороформом по 30 мл при двухминутном встряхивании. Объединенный экстракт на ротационном испарителе упаривается досуха. Сухой остаток смывается 5 нл ацетона и порции 1-5 мкл аналивнруютоя метолом гавохндкостной хроматографии с нетто львовзкяом тормоигагого детектора.

2.5.2.    Экстракция смосью водо-ацотоп-гексан (ф;ф;4)

Ход определения аналогичен описанному вше о той лишь разницей, чт*"* вместо петролейного еФира копояьзуотся гокеял.

2.5.3.    Экстракция смесью водз-ацетон-хлороТюш (1:1:4)

Так же, как и в п. 2.4.1, только после упаривания ацетонового вкстракта оухоЙ остаток смывается не хлороформом, а петро-лейньм офнррм.

2.5.4. Условия хроматографирования

Детекторы термоионяый <Д1*И) и в лект роллов ахватннй (ЭЗД) • Скорость протяжки ленты 2-9 имД.лн.

Рабочие шкал г.: 1:10"¹⁰ а (ДТИ) и 10"¹¹ а (ЭЗД) Томпературнво режимы: испарителя 220°С, колонки 190°С, детектора 220°С. Скорости потоков газов (мл/мня): газа-носителя (азот, особой чистоты, аргон, х.ч.) - 80 (ДТИ) и 60 (ЭЗД), про -дурного rasa - 180; водорода - 27; воздуха - 400;

напряжение, подаваемое на детекторы - 800 в.

8.5.5. Время удерживания пестицидов

Пестицид Фаза    :    Ф    a    t    а    :    Ф a s а (О V17+СКТФТ-50)i<$Е-30+Х£-60): ЮТА ino гамма-ГХЦГ :го гамма-ГХЦГ: по пропавину

Альфа-ГХЦГ 0,77 0,73 — Гамма-ГХЦГ 1,0 (3,92мин) 1,0 (3,42мин) - Бета-ГХЦГ 1,19 3,12 - 4,4-ДЦЭ 3,72 - - 4,4-ДДД 5,85 - - 4,4 -да 7,13 ♦» - Симазил 1,52 Атразин 1,23 Пролазил 1,0 (б ,6шш)

Линейность детектирования хлороргааичоских пестицидов соблюдается в пределах 0,02-0,5 ter для альфа и гамма-ГХЦГ, 0,06-1,0 кг для бета-изомера ГХЦГ, 0,08-1,2 нг для 4,4-ДДЭ, 0,12-1,5 кг для 4,4ОДДД а 0,25-3,0 яг для 4,4-ДДТ.

ЛмяеЙяо-динами че о кий диаиазон для симм-триазняов 0,2-20 нг.

2.6. Обработка результатов анализа.

Количественное определение пестицидов кроводятппутем оравнивания высот пиков исследуемого вепрства из экстракта и стандартного раствора по формуле:

-22-

A . Hg . g . 100*

Н± . _t . P . К

где, X - коли'ротво пестицидов, мг/кг

А - количество пестицидов в стандартном растворе, вводегаюм в хроматограф, иг,

В₁ - BHCOta пика стандартного раствора, мм Hg - высота пика анализируемой пробы, мм V_± - обьем аликвоты, введенной в хроматограф, мкл V₂ - общий обьем экстракта после упаривания (до разделения на две разные чисти), мл Р - навеска анализируемого образца, г

К - подлога определения каждого пестицида в почве *, (табл.2).

8. Тробовапия безопасности

Соблюдаются требования безопасности, обычно рекомендуемые при работе с логковосплам^нщхцимися органическими растворителями, концентрированными кислотами и сжатии газами.

4.    Настоящие методические указания разраоотанн В.Г.

Ну карманом (Алма-Атинский филиал ШНАО) и Г. А. Пивоваров w ОВДАО).

5.    Настоящей методикой можно с высокой производительностью провести определение хлорорганичоских и симм-триаяино-внх пестицидов при совместном их присуствич в почве. Для paste ль ного определения в почве эг*х групп пестицидов могут бмтт» использованы методические указания № 1766 от 12.10.77 г (хлор-оргппические пестициды) и № 2145-60 от 28.01.80г. (симм-три-аяияояыо 1ч>рбнциды).

-259-

ССДБРЖАНИЕ

ХЛОРОРГАНлЧЕСКИБ ПЕСТИЦИДЫ

I.Временные методические указания указания по

определению ХОП (ДДТ,ДДЗ,ДДД, -ГХЦГ) в рыбе и рыбной продукции методом газожидкостной хроматографии.

2. Методические указали® по определению ХОП и сим-триазиновых пестицидов при их совместном присутствии в почве с помощью Г1Х*

3* Временные методические указания по определению остаточных количеств митрана в воде,сливах и

^яблоках методом ТСХ.

ШЙОРОРГАНИЧВСКИВ ПЕСТИЦИДУ

1.    Мотодические указания по определению афоса в воздухе рабочей зоны методами ГЬХ и ТСХ.

2,    Временные методические указания по определению боя-стара в ботве и клубняах картофеля,листьях и стеблях хлопчатника,капусте,почве к водэ ТСХ и ГЗЕХ.

3* Методические указания по определению глифосата и его метаболита- аминометилфосфоновой кислоты методом хроматографии в воде,почве,растительном материале,

4.    Мотодические указания по определению остаточных количеств дурсбана в воде,почве,лесной растительности

и биосредах методом ТСХ.

5.    Временные методические указания по определению каун-тора в растениях сахарной свеклы и почве методом ТСХ,

260-

6* Методические указания по определению метилмеркалто-фоса в воде,почве,винограде и зеленой массе хмеля ГЖХ и ТСХ.    67

7.    Временные методические указания по определению о<$у-

нака методами ГЖХ и ТСХ в почЕе,растениях,воде водоемов.    76

8.    Зременные методические указания по определению протио-фоса в растительном материале,почве и воде методами

ГКХ и ТСХ.    82

9.    Временные методические указания по определению се-лекрона в растительной продукции,почве и воде ТСХ

и ГЖХ.    91

10.    временны» методические указания по определению хлоро

фоса энзимно-хроматографическим методом в листьях болладоны и траве мяты перечной.    90

11.    Методические указания по определению в зерне и про

дуктах его переработки ФОП.применяемых для обеззараживания зерна и зернохранилищ,хроматографическими методами.    ₁₀₅

АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ПЕСТИЦИД]

1.    Методические указания по определению остаточных количеств пкрекса,диносеба,каратака,ДНОКа в воде,почве.

и растительном материале    хроматографическими методами. цу

2.    Временные методические указания по определению байгой*

методом ГЗКХ в молоке.    138

3.    Временные методические указания по определению барнона в воде,почве,растениях методом ГЖХ.

Настоящие методические указания предназначены для

санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслодова-телъских учреждений Минздрава СССР,а также ветеринарных_вагрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания,кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качество официальных группой экспертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками при ИЛ СССР.(Председатель группы экспертов - М.Д.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования саяэпидслу^бы ИМПиТМ им.Мар-нпновского Е.Я. и лабораторным советом при Главней санитарно-эпидемиологическом управления Кик здрава СССР.

"УТВБВДЛЮи Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР А.И.Заиченхо

"С1^,Ш«.Лаа1.Г_А

203-81

^asBio*RB&£aaie учгаданшя гю определению хлорорганичоских *    по стидидо в при совместной юс прнсут-

(стшшй а швгав* с вомсад>н газохндкостной хроматографии

2- 2вшшая х^гкгэрнствка препаратов (см.таблицу ff 1)

Ж-    сщредедроия    xxopopi    всяческих    и    сны    -триазшю-

iiusc шяаыщедав 1црш £©±ийэстшм их присутствии в почве с помощью iragasacL ьпсянт и лзриЕгтогрз-дм.

J2-2U ©сяшшыв виадш

2J-2-2L. Я|ркпгапг юэтади- /Метод основан на экстракции хлор-«давдотаыос яв caai-^rpasaaMimcnx пестицидов в одной из трех а&аи«оздш1^яцдк сжстеов расаяюритолей (вод а-ацо тон-по тролейкый - 2x1:4* мда-ащ>тон-гпкс^1Н-1:1:4, вода-ацотон-хлороформ-еддаэтяв «шттраапгз* серной кислотой я поел оду идеи опре-зыт&шш [гшпмшкхтФг хроматограф о ft с использованием терыо--оиишю а&    ^^д^типго    детекторов.

St~l~XL. Жеавшашическая характеристика метода..

'Шнкшм*    овдалалеиия в пробе почвы м минимально

дитчоджодки1на iKajura«<cz^ra хлорорганичоских н сим-триазинолмх •uiM2№uuuaiB сиыйхмиаышймаа составляют 0, ,0004 мг/кг и 0,02 за’ лдаи аиаЩтш тг<аыма жодмарэ* ГХЦГ; 0,0012 ш/кг в 0^D6 ггг Д1я

- (DJBID1KC ШП^НГ ш 0,08 чг для 4,4-ДДЭ; 0,0024 иг/кг и *нг да-»* Л,,и-М;    мг/кг    «    0,25    аг    для    4,-4-ДДТ^    0,(К)4

ТаДлкга 2

Метрологическая характеристика газохроматографяческого изтсда определения хлороргакичесиэс н сэ.тл-триазинэвых пестицидов в почве. Авализируечпя почва - чернозем, экстрагент - алетоз-вода петролейнкЗ э^ир - 1:1:4, гь = 4, доверительная вероятность Р*0,95

Тип почвы j Экстрагент    !    Пестициды

Таблица 3 Процент обнаружения хпороргаяичесхих и сшал-триазиноиа пестицидов в разных типах нота при извлечении различными эгстрагирутеиш системами 1    ! Альфа-! Галгла-! Бе та-! 4 Л- !414-!414-!Сию-!Атра-!Проца- I    1ГШГ !ГШГ !ГХЦГ' !ДЬ !ДЛд !ЙГ !нин 1зин !зпн

Чернозем ада тон-вода-гексан 1:1:4 азетои-зода-детрсшейинй э$ир 1:1:4 адетон-_лда-хлорофоры 91 92 83 89 90 87 87 87 86 SI 92 65 89 90 65 90 91 63 84 62 90 86 86 88 85 85 86 Темно- апетон-вода-гексан-1:1:4 83 86 85 86 88 85 83 87 68 каштановая адетон-вода-петрслейный э$Е? 1:1:4 91 90 86 90 90 87 84 87 87 аготон-вода-хлорзформ 88 85 83 60 60 56 89 87 68 Серозем аде тов-вс да-гексан 1:1:4 91 63 86 68 90 88 88 86 87 адетон-вода-петролейный э4ир 1:1:4 92 89 87 88 90 89 87 88 83 адетон-вода-хдорофоры I:Хз4 92 88 89 65 65 60 91 87 88 Леоново- апетон-эода-гекеан 1*1:4 93 92 91 92 94 95 85 85 51 подзолистая адотов-водз-петоодейный эфир 1:1:4 94 92 93 93 94 95 88 87 85 адетон-вола-хлороформ 86 88 92 78 76 83 83 84 62

-16-

мг/кг и 0,2 нг для скмазииа, атразяна и пропазкна. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 2.

Процент обнаружения внесенных количеств хлорорганических пестицидов и сим-триаэиновых гербицидов при испольвовании 8-х различных систем растворителей для экстракции приведен в таблице 8.

2.1.8. Избирательность метода

Метод селективон. Хлороргапич^скке и сим-триязиновне пестициды взаимному определению не мешают. Пестициды других групп также не мечтают проведению анализа,

2.2. Реактивы и материалы Ацетон, х.ч., ГОСТ-260379

н-Гексан, х.ч. дважды перегнанный, ТУб-09-9375-78 Петролейлый эфир (40-70°С), х.ч. дважды перегнанный (используется только фракция 36-55°С), ТУ МХП 1867-48

Хлороформ, х.ч. дважды перегнанный, ГОСТ-20015-74 (все растворители перед работой проверяются на чистоту.

Для проверки чистоты 100 мл каждого растворителя упаривают на ротационном испарителе до обьема 1 мл и аликвоту 10 мкл анализируют на газовом хроматографе с электронноеахватнш и терко-яоянью детекторами. Растворитель признается «чистом», если нет посторонних пиков).

Кислота серная, х.ч., удельный вес 1,8-1, ГОСТ-4204-76 Натрий сернокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 41/56-76 Етгрий двууглекислый, х.ч. 0,5 я раствор, ГОСТ 83-70 Эталонные расторн спмм-тривзютовых в ацетоне и хлорорганв-чесютх пестицидов в гексане в концентрации 100 мкг/мл. Из эталонных растворов разбавлением готовятся рабочие растворы скмм-триавньоьых гербшщдов в концентрации 1 мкг/мл, альфа, гамга к

нС7 -

бега - ГХДГ - 0,05 мхг/мл, 4,4-ДДЭ - 0,26 ыкг/ил, 4,4-ДДД-0,25 мхг/мл, 4,4-ДДТ-0,5 ыкг/ых.

Насадки ддя колонок: 1) 5* поди&тиленгликольадипмиат на хроматине^ -Av/ДМХС, 0,185-0,160 им. 2) 34 0У - 17 на хрома • тоне//” г- супер, 0,125-0,160 мм. 3) 4* СКТФТ-50, на хром а то не М -супэр., 0,125-0,160 мм. 4) 54 SE - 30 на хроматонв А/-Л W~ ДМХС, 0,125-0,160 мм. 5) 54 ХЕ-60 на хроматонв г/ -Ач\/ДМХС, 0,125-0,160 мм.

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

Газовый хроматограф (Цоет-5, Цвет-1С6) ш другие хроматографы, имеодио олектрояно-эахватный и термоионный детекторы.

Холопки стеклянные, длиной 1 мотр и внутренним диаметром 3_;5 мм с насадкой 54 полиэтилонгдякохьадипкнат на хроматош),//-А у/ДМХС, 0,125-0,160 мм для определения симм-триазнновых гербицидов; и колонки с насадкой из двух жидких фаз, приготовляемой путем смешивания ь соотношении 1:1, по обьему, э4 qn/ - 17 на хроматояв//£м)с 0,125-0,160 мм с 44 СКТ&Т-50 на том же носителе для определения хяорорганических пестицидов.

В качество дополнительной колонки с повыиенной разрешающей способностью при анализе альфа, гамма, бета - изомеров ГХЦГ может быть рекомендована колонка с насадкой, приготовленной путем смешивания в соотношении 1:1,5 по обьему, 54    ,$£- ЕЮ кэ хрома

тонв М -А\^*-ДМХС, 0,125-0,160 мм с 54 ХЕ-60 на том же носителе.

Микроашркцы "ШЫО" - 2 шт.

Сушильный шкаф

Ротационный испаритель

Баня водяная влектрическал

Аппарат для встряхивания

Колбы плоскодонные вместимостью 2£0 мл для вкстракции

-If-

Мерные цилиндры вместимостью 10,25 и 50 мл, ГОСТ 1770-74 Градуированные пробирки с притортыии пробками вместимостью 15 мл, ГОСТ 10515-75

Воронки лабораторные диаметром 4-6 см, ГОСТ 8513-75 Пипетки вместимостью 1,0; 2,0; 10 мл ГОСТ 20292-74

2.4. Отбор проб Отбор проб производят в соответствии с "Упифицированными правяда&ги отбора проб....»», утвержденными заместителем Главного Государственного Санитарного враче СССР А.И.Зайченко гв В 2051-79 от 21 августа 1979 г. При невозможности проведения немедленного анализа почвы ее хранят в воздушно-сулои состоянии в холодильнике при температуре 1-3°С. После выполнения анализа образцы гочвы помещают на стеллажи в прохладное помещение и сохраняют в лечение одного года.

2.5. Проведение определения 2.5.1. Экстракция смесью вода-ацетон-детролейный эФир (1:1:4) и очистка экстрактов Пробу воздушно-сухой почвы массой 25 г помещают в экстракционную колбу, заливают 20 мл смеси вод^-ацотон (1:1)* перемешивают, приливают 40 мл петролейного эфира, встряхивают 1 минуту и оставляют на 15-18 часов (на ночь).

После этого экстракционную колбу встряхивают в течение одного часа на аппарате для встряхивания, дают слоям разделиться и эфирный слой осторожно декантируют в приемную колбу. Экстракцию повторяют още дважды петролейяым эфиром порциями по 40 мл при встряхивании соответственно в течение 30 и 20 минут.

После каждой экстракции петролейный эфир декантируют и экстракты с л к в лотов в приемную колбу. Остаток гробы в ксдбо дважды